При синтезе аффинных сорбентов полезно не только удостовериться, что белок иммобилизовался на шариках, но и определить сколько именно село.
Часто в протоколах приводят метод определениях концентрации лиганда путем измерения его содержания в исходном растворе и в проскоке после иммобилизации. Но мне кажется, так не совсем точно, часть белка остается в порах и уходит при промывке, а там белок разбавленный, толком не измеришь.
Но есть интересный способ определения концентрации иммобилизованного белка методом прямой спектрофотометрии сорбента.
Для этого нужно налить в кювету 100% глицерин, суспендировать небольшое количество промытого и подсушенного на фильтре сорбента с иммобилизованным белком. Перемешивать нужно аккуратно, чтобы не попали пузырьки воздуха. Глицерин предотвращает осаждение частиц и облегчает измерение.
Потом остается измерить поглощение при 280 нм против взвеси сорбента без белка. Вообще, можно еще и калибровочную кривую сделать, добавляя известное количество белка к суспензии исходного сорбента.
В литературе олды пишут еще про полиэтиленгликоголь и другие оптически прозрачные вязкие жидкости (концентрированный раствор сахарозы, этиленгликоль), но я только с глицерином делал.
При синтезе аффинных сорбентов полезно не только удостовериться, что белок иммобилизовался на шариках, но и определить сколько именно село.
Часто в протоколах приводят метод определениях концентрации лиганда путем измерения его содержания в исходном растворе и в проскоке после иммобилизации. Но мне кажется, так не совсем точно, часть белка остается в порах и уходит при промывке, а там белок разбавленный, толком не измеришь.
Но есть интересный способ определения концентрации иммобилизованного белка методом прямой спектрофотометрии сорбента.
Для этого нужно налить в кювету 100% глицерин, суспендировать небольшое количество промытого и подсушенного на фильтре сорбента с иммобилизованным белком. Перемешивать нужно аккуратно, чтобы не попали пузырьки воздуха. Глицерин предотвращает осаждение частиц и облегчает измерение.
Потом остается измерить поглощение при 280 нм против взвеси сорбента без белка. Вообще, можно еще и калибровочную кривую сделать, добавляя известное количество белка к суспензии исходного сорбента.
В литературе олды пишут еще про полиэтиленгликоголь и другие оптически прозрачные вязкие жидкости (концентрированный раствор сахарозы, этиленгликоль), но я только с глицерином делал.
Channels are not fully encrypted, end-to-end. All communications on a Telegram channel can be seen by anyone on the channel and are also visible to Telegram. Telegram may be asked by a government to hand over the communications from a channel. Telegram has a history of standing up to Russian government requests for data, but how comfortable you are relying on that history to predict future behavior is up to you. Because Telegram has this data, it may also be stolen by hackers or leaked by an internal employee. Ukrainian President Volodymyr Zelensky said in a video message on Tuesday that Ukrainian forces "destroy the invaders wherever we can." "There are a lot of things that Telegram could have been doing this whole time. And they know exactly what they are and they've chosen not to do them. That's why I don't trust them," she said. On Telegram’s website, it says that Pavel Durov “supports Telegram financially and ideologically while Nikolai (Duvov)’s input is technological.” Currently, the Telegram team is based in Dubai, having moved around from Berlin, London and Singapore after departing Russia. Meanwhile, the company which owns Telegram is registered in the British Virgin Islands. Additionally, investors are often instructed to deposit monies into personal bank accounts of individuals who claim to represent a legitimate entity, and/or into an unrelated corporate account. To lend credence and to lure unsuspecting victims, perpetrators usually claim that their entity and/or the investment schemes are approved by financial authorities.
from us
